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偶聯標記技術瞭解一下

由 每日生物評論 發表于 攝影2021-05-15
簡介如果溶液酸性過強,胺變成了銨鹽,使芳環電子雲密度降低,不利於偶聯反應,如果從重氮鹽的性質來看,強鹼性介質會使重氮鹽轉變成不能進行偶聯反應的其它化合物

偶合反應為什麼在弱酸性介質中進行

偶聯標記技術瞭解一下

1。怎麼定義偶聯?

將酶、生物素、熒光素、瓊脂糖、磁珠等一些易於檢測或易於分離的物質,用一定的技術共價標記或綴合到抗體、蛋白質或其它小分子物質上。

2。為什麼會有偶聯技術的產生?

抗體、蛋白質或其它小分子的偶聯是許多型別的生物學實驗的必要步驟。比如:

為了在免疫測定(比如WB/IHC/IF等免疫學實驗)中進行特異性蛋白的檢測,我們將一抗或者二抗上偶聯上酶、熒光素等;在細胞染色(生物成像)應用中,將活性染料(熒光素)直接與細胞外或細胞內的蛋白(多肽)結合,以產生可見且可測量的染色;將蛋白質或抗體上偶聯瓊脂糖或磁珠,提供了靶向純化的方法。比如,Abbkine用於IP實驗的瓊脂糖(磁珠)偶聯的抗體,直接省去了ProteinA/G的使用。

偶聯反應

偶聯反應(英文:Coupling reaction),也作偶連反應、耦聯反應、氧化偶聯,是由兩個有機化學單位(moiety)進行某種化學反應而得到一個有機分子的過程。這裡的化學反應包括格氏試劑與親電體的反應(Grinard),鋰試劑與親電體的反應,芳環上的親電和親核反應(Diazo, Addition-Elimination),還有鈉存在下的Wutz反應,由於偶聯反應 (Coupling Reaction)含義太寬,一般前面應該加定語。而且這是一個比較非專業化的名詞。 狹義的偶聯反應是涉及有機金屬催化劑的碳-碳鍵生成反應,根據型別的不同,又可分為交叉偶聯和自身偶聯反應。進行偶聯反應時,介質的酸鹼性是很重要的。

一般重氮鹽與酚類的偶聯反應,是在弱鹼性介質中進行的。在此條件下,酚形成苯氧負離子,使芳環電子雲密度增加,有利於偶聯反應的進行。重氮鹽與芳胺的偶聯反應,是在中性或弱酸性介質中進行的。在此條件下,芳胺以遊離胺形式存在,使芳環電子雲密度增加,有利於偶聯反應進行。如果溶液酸性過強,胺變成了銨鹽,使芳環電子雲密度降低,不利於偶聯反應,如果從重氮鹽的性質來看,強鹼性介質會使重氮鹽轉變成不能進行偶聯反應的其它化合物。偶氮化合物是一類有顏色的化合物,有些可直接作染料或指示劑。在有機分析中,常利用偶聯反應產生的顏色來鑑定具有苯酚或芳胺結構的藥物。

文章來源:每日生物評論

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