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解析度(上)— 做成像的你不能不瞭解的真相6
成清晰的像說明什麼
“你這個手機相機解析度是多少?”
“XPPO,前後2000萬,拍照更清晰!”
“哇,解析度這麼高!”
說到解析度,大家第一個反應是看有多少畫素,而且認為畫素越多,解析度就越高,影象質量也越好。這種說法,當我們單純看影象解析度或者顯示器解析度時,也可以說沒錯。但在討論科研相機的解析度和成像質量時,單看畫素個數是不全面的,應該使用更科學的標準來判斷。今天我們就來詳細的聊一聊科研相機的解析度。內容分為以下幾個部分:
科研相機的解析度
顯微鏡的光學解析度
相機與顯微鏡的解析度匹配
C-Mount對解析度的影響
實驗論證
科研相機的解析度
如下圖所示,假設相機晶片尺寸不變,當畫素個數越多時,影象的解析度也越提高。但注意這裡有一個前提,
相機晶片尺寸不變
。事實上,當畫素個數增加時,單個像元的尺寸變小,這才是解析度提高的真正原因。所以更準確地說,是像元尺寸越小,相機解析度越高。
由此我們得到關於解析度的第一個結論:
像元尺寸決定相機解析度。像元尺寸越小,解析度越高。
既然這樣,我們是不是應該總是選擇像元小的相機就好了呢?顯然不是,這裡穿插一點信噪比的討論。以單個像元來看,如果影響信噪比的其他幾個引數如量子效率(QE)、讀出噪聲(read noise)、暗噪聲(dark noise)都不變,
像元尺寸越大,單個像元收集到的訊號越多,則影象的信噪比越高
。所以,信噪比和解析度是相互制約的兩個引數。提高信噪比要求像元儘量大,提高解析度要求像元儘量小。在選擇相機的時候,如果是極弱光和高速的應用,需要追求極限靈敏度,那麼選擇像元儘量大的相機,譬如Photometrics Prime 95B sCMOS像元11 μm;如果追求解析度,那要選擇像元儘量小的相機,譬如Photometrics Iris15,1500萬畫素,像元小至4。25 μm。通常對顯微成像的應用,希望兩者兼顧,我們給出關於解析度的第二個結論:
相機的解析度和顯微鏡的光學解析度需要相匹配,才能獲得高質量的影象。
現在我們先談談顯微鏡的解析度。
顯微鏡解析度
顯微成像,是樣品上的光訊號透過物鏡放大後成像的過程。由於物鏡收集訊號的開口尺寸(Objective aperture)是有限的,訊號在透過物鏡邊界時會發生衍射。這個現象可以把物鏡的開口近似為一個小孔來說明。
如下圖所示,發生衍射後所成的像,比實際的樣品大。通常XY方向在200-300nm,Z方向在500-800nm。
圖2。 衍射極限點
顯微鏡物鏡所成的像,為中間一個亮點,和一系列環繞它的亮度漸弱的衍射環組成,稱為
艾裡斑
。物鏡的
數值孔徑(NA)
越大,中間的亮斑越小。
亮斑的尺寸可以由公式計算:
其中λ是光的波長,NA是物鏡的數值孔徑。
當兩個艾裡斑不斷接近,直到肉眼不可分辨時,艾裡斑中心間隔的距離就是此物鏡的解析度。
圖4。 瑞利判據
物鏡解析度由以下公式定義,稱為瑞利判據(Rayleigh Criterion)
透過以上公式,我們可以計算出各個物鏡的解析度。接下來就是最重要的
相機的解析度與物鏡的解析度匹配
的問題了。那究竟如何做匹配呢?C-Mount又是如何影響解析度的呢?小編先賣個關子,大家一定能從我們解析度下篇中找到答案。
關鍵詞:顯微成像、光學解析度、信噪比、相機的解析度與物鏡的解析度匹配